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이 단계에서, 우리의 작업은 체 판 개발을 위해 CHER1 필요한 세포 과정을 완전히 밝히지 않습니다. 식물에서 CTLs의 분자 및 생리 적 기능을 명확히 하기 위해 추가 조사가 필요 합니다. 이러한 분석을 위해, 애기 장 대의 3 개의 cher1 대립 유전자는 중요 한 자원을 제공할 수 있다. (a-c) PCHER1의 공동 현지화:: CHER1-a1-RFP와 TGN 마커를 가진 YFP. 스케일 바, 7.5 μ m. (d) 애기 장 근에서 CHER1의 면역 금 라벨링. G, 골 지. 스케일 바, 250 nm. pCHER1: CHER1-YFP 표현식을 루트의 걸러 및 외부 레이어로 표현 합니다.

노란색 화살표는 루트의 외부 레이어에서 셀 플레이트 별 CHER1 표현식을 나타냅니다. 흰색 화살표는 요소 별 CHER1expression 나타냅니다. 스케일 바, 50 μ m. (f) pCHER1: CHER1 피 질 및 표 피 세포에서의 YFP 발현. 스케일 바, 7.5 μ m. (g) pCHER1: CHER1 피 질 및 진 피 세포의 세포 판에서의 3D 프로젝션에서의 YFP 링 유사 국 소화. 스케일 바, 5 μ m. pCHER1를 발현 하는 내 진 피 세포의 6-디 아미노 노 2-페니 린 돌 (DAPI) 염색 법:: CHER1-YFP.

스케일 바, 7.5 μ m. (i, j) 초기 걸러 체 요소에서 극성 CHER1 현지화. Protophloem 체 요소는 별표로 표시 됩니다. 스케일 바, 25 μ m. (k, l) 3 차원 돌기에서 체 판에 CHER1의 지속적인 발현 패턴. 스케일 바, 5 μ m. 체 플레이트의 SEM 조사를 위한 애기 장 대 조직은 previously68 기재 된 바와 같이 제조 하였다. 요컨대, 식물은 액체 질소에 충격을가 하 고, 에탄올에서 동결 치환 되었고, 세포질은 2 주 동안 0.5%의 프로 테이 나 제 K 및 8% 트리톤 X-100에서 소화 되었다. 조직은 세척, 동결 건조, 스퍼터 코팅 및 FEI Quanta 200 FEG SEM에서 관찰 되었다. SE 세포에서 CHER1의 흥미로운 극성 국 소화는 CHER1이 체 판의 구체화에 역할을 할 수 있음을 시사 한다.

직렬 블록-얼굴 주사 전자 현미경 (SBEM)을 사용 하 여 우리는 다음 두 개의 WT (235에서 562 μ m에 이르기까지 및 루트 팁에서 210에서 525 μ m)의 직렬 단면화 된 뿌리를 비교 하 고 두 개의 cher1 (162에서 408 μ m까지 그리고 루트 팁에서 129에서 445 μ m까지). 묘 목 뿌리 팁 이리저리 m은 enucleated SEs가 형성 되기 시작 하는 루트 내의 영역에 대 한 정 동작 센터 (QC) 이다 (도 5a). 또한, 우리는 성숙한 cher1 및 WT 뿌리에서 체 판을 분석 했습니다 (도 6c, d). 이 데이터는 wt와 비교 하였을 때 감소 된 체 판 면적 17.16 (cher1 및 20.01 μ m2에서 중량 평균)을 가짐에도 불구 하 고 cher1 돌연변이 체 기 공 밀도 1.86 (2.35 cher1의 μ m/m/m/m/m/m/m/m/m/m/m/m/m/m의 기 공)를 중량 기준으로 하였다 (도 1